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浮游菌采樣器的測試流程,原來可以這么簡潔

更新時間:2021-12-14      點擊次數:2089


 

   浮游菌采樣器用于制藥GMP廠房、乳制品廠房、醫院手術室、生物潔凈、發酵工業等潔凈室和無菌環境中的空氣微生物檢測以及有關研究教學部門作空氣微生物的采樣研究。

浮游菌采樣器一種多孔吸入式塵菌采樣器。它根據顆粒撞擊原理和等速采樣理論設計,采樣直接,采樣口風速與潔凈室內風速基本一致,能更準確地反映潔凈室內的微生物濃度。采樣時,帶塵菌空氣高速通過微孔,被撞擊在培養皿內的瓊脂表面;這些活體微生物在培養過程中,發生動態再水化過程,高速生長,從而更快得出結果。

 

浮游菌采樣器的測試流程:

測試方法

4.1 方法提要

本方法采用計數濃度法,即通過收集懸游在空氣中的性粒子于專門的培養基,經若干時間,在適宜的生長條件下讓其繁殖到可見的菌落進行計數,從而判定潔凈環境內單位體積空氣中的活微數,以此來評定潔凈室(區)的潔凈度。

4.2 所用的儀器、設備和培養基

a)浮游菌采樣器;

b)真空抽氣泵;

c)培養皿;

d)培養基;

e)恒溫培養箱。

4.3 浮游菌采樣器

浮游菌采樣器宜采用撞擊法機理的采樣器,一般采用狹縫式采樣器或離心式采樣器。

4.3.1 采用的浮游菌采樣器須要有流量計和定時器。

4.3.2 狹縫式采樣器的原理

狹縫式采樣器由附加的真空抽氣泵抽氣,通過采樣器的縫隙式平板,將采集的空氣噴射并撞擊到緩慢旋轉的平板培養基表面上,附著的活微粒子經培養后形成菌落,予以計數。

4.3.3 離心式采樣器的原理

離心式采樣器由于內部風機的高速旋轉,氣流從采樣器前部吸入從后部流出,在離心力的作用下,空氣中的活微粒子有足夠的時間撞擊到專用的固形培養條上,經培養后形成菌落,予以計數。

4.3.4 狹縫式采樣器的使用要點

應嚴格按儀器說明書的要求進行操作。

4.3.4.1 校驗

采樣器須按儀器的檢定周期,定期對儀器作檢定,以保證測試數據的可靠性。校驗的項目有:定時器、轉盤轉速、流量計。

4.3.2 每次測試前應按說明書上的規定,先接通電源,啟動真空抽氣泵,然后調節流量計及定時器。

4.3.4.3空氣采樣量根據需要選定。已知采樣器的流量(L/min),設定采樣時間(min),兩者相乘即采樣量(L)。

4.3.4.4 注意事項

4.3.4.4.1 采樣口須用便于消毒及化學性能穩定的材料制造。

4.3.4.4.2 采樣管嚴禁滲漏,內壁應光滑。

4.3.4.4.3 采樣管的長度應根據測點的高度定,盡量減少彎曲。

4.4 真空抽氣泵

4.4.1 真空抽氣泵的排氣量應與采樣器匹配。

4.4.2  宜采用無油真空抽氣泵,必要時可在非氣口安裝氣體過濾器。

4.4.3 真空抽氣泵安裝的位置須適當,一般裝在采樣器下面。

4.5 培養皿

4.5.1 狹縫式采樣器一般采用?150mm×15mm?90mm×15mm?65mm×15mm三種規格的硼硅酸玻璃培養皿。可根據所選用采樣器選擇合適的培養皿。

4.5.2 離心式采樣器采用專用的固形培養條。

4.6 培養基

普通肉湯瓊脂培養基或其他藥典認可的培養基。其配制方法見附錄A(標準的附錄)。

浮游菌采樣器

4.7 恒溫培養箱

須定期對培養箱的溫度計進行檢定。

4.8 測試步驟

4.8.1 測試前儀器、培養皿表面須嚴格消毒。

4.8.1.1 采樣器進入被測房間前先用消毒房間的消毒劑滅菌,用于100級潔凈室的采樣器宜一直放在被測房間內。

4.8.1.2 用消毒劑擦凈培養皿的外表面。

4.8.1.3采樣前,先用消毒劑消毒采樣器的頂蓋、轉盤以及罩子的內外面,采樣結束,再用消毒劑輕輕噴射罩子的內壁和轉盤。

4.8.1.4采樣口及采樣管,使用前須高溫滅菌。如用消毒劑對采樣管的外壁及內壁進行消毒時,應將管中的殘留液倒掉并晾干。

4.8.1.5 采樣者應穿戴與被測潔凈區域相應的工作服,在轉盤上放入或調換培養皿前,雙手用消毒劑消毒。

4.8.2 狹縫式采樣器的采樣程序

4.8.2.1儀器經消毒后先不放入培養皿,開動真空泵抽氣,使儀器中的殘余消毒劑蒸發,時間不少于5min,并調好流量、轉盤轉速。

4.8.2.2 關閉真空泵,放入培養皿,蓋上蓋子后調節采樣器縫隙高度。

4.8.2.3 置采樣口于采樣點后,依次開啟采樣器、真空泵,轉動定時器,根據采樣量設定采樣時間。

4.8.3 培養

4.8.3.1 全部采樣結束后,將培養皿倒置于恒溫培養箱中培養。

4.8.3.2 30℃~35℃培養箱中培養,時間不少于48h

4.8.3.3 每批培養基應有對照試驗,檢驗培養基本身是否污染。可每批選定3只培養皿作對照培養。

4.8.4 菌落計數

4.8.4.1 用肉眼直接計數、標記或在菌落計數器上點計,然后用510倍放大鏡檢查,有否遺漏。

4.8.4.2 若平板上有2個或2個以上的菌落重疊,可分辨時仍以2個或2個以上的菌落計數。

4.8.5 注意事項

4.8.5.1 使用前仔細檢查每個培養皿的質量,培養基及培養皿有變質、破損或污染的不能使用。

4.8.5.2 采取一切措施防止采樣管的污染和其他為對樣本的污染。

4.8.5.3 對培養基、培養條件及其他參數作詳細的記錄。

4.8.5.4由于細菌種類繁多,差別甚大,計數時一般用透射光于培養皿背面或正面仔細觀察,不要漏計培養皿邊緣生長的菌落,并須注意細菌菌落或培養基沉淀物的區別,必要時用顯微鏡鑒別。


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